ՄԻԱՎ-ի հակամարմիններ Արագ թեստի ձայներիզ (կոլոիդային ոսկի)
ՄԻԱՎ-ի ԱՐԱԳ ԹԵՍՏ
ԱՄՓՈՓՈՒՄ
ՄԻԱՎ-ով վարակի հայտնաբերման ընդհանուր մեթոդը վիրուսի նկատմամբ հակամարմինների առկայության դիտարկումն է ՇՄԱԳ մեթոդով, որին հաջորդում է Western Blot-ի հաստատումը:ՄԻԱՎ-ի մեկ քայլի թեստը պարզ, տեսողական որակական թեստ է, որը հայտնաբերում է հակամարմինները մարդու ամբողջական արյան/շիճուկի/պլազմայի մեջ:Թեստը հիմնված է իմունոքրոմատոգրաֆիայի վրա և կարող է արդյունք տալ 15 րոպեի ընթացքում։
ՆԱԽԱՏԵՍՎԱԾ Է ՕԳՏԱԳՈՐԾՄԱՆ ՀԱՄԱՐ
ՄԻԱՎ-ի մեկ քայլի թեստը կոլոիդային ոսկով ուժեղացված, արագ իմունաքրոմատորաֆիկ անալիզ է մարդու ամբողջական արյան մեջ (շիճուկ/պլազմայում) (ՄԻԱՎ) հակամարմինների որակական հայտնաբերման համար:Այս թեստը սկրինինգային թեստ է և բոլոր դրական արդյունքները պետք է հաստատվեն այլընտրանքային թեստի միջոցով, ինչպիսին է Western Blot-ը:Թեստը նախատեսված է միայն առողջապահության մասնագետների օգտագործման համար:Ե՛վ թեստավորումը, և՛ թեստավորման արդյունքները նախատեսված են օգտագործելու միայն բժշկական և իրավաբան մասնագետների կողմից, եթե այլ բան նախատեսված չէ օգտագործման երկրի կանոնակարգով:Թեստը չպետք է օգտագործվի առանց համապատասխան վերահսկողության:
ԸՆԹԱՑՔԻ ՍԿԶԲՈՒՆՔ
Փորձարկումը սկսվում է նմուշի վրա, որը կիրառվում է նմուշի ջրհորի վրա և անմիջապես տրամադրված նմուշի լուծիչի ավելացումով:ՄԻԱՎ-ի հակագեն-կոլոիդ ոսկու կոնյուգատը, որը տեղադրված է նմուշի միջադիրում, արձագանքում է շիճուկում կամ պլազմայում առկա ՄԻԱՎ-ի հակամարմինների հետ՝ ձևավորելով կոնյուգատ/ՄԻԱՎ հակամարմինների համալիր:Քանի որ խառնուրդը թույլատրվում է գաղթել փորձարկման շերտի երկայնքով, կոնյուգատ/ՄԻԱՎ հակամարմինների համալիրը գրավվում է հակամարմիններ կապող A սպիտակուցի կողմից, որն անշարժացված է մեմբրանի վրա, որը գունավոր գոտի է կազմում փորձարկման շրջանում:Բացասական նմուշը փորձարկման գիծ չի առաջացնում կոլոիդ ոսկու կոնյուգատի/ՄԻԱՎ հակամարմինների համալիրի բացակայության պատճառով:Թեստում օգտագործվող անտիգենները ռեկոմբինանտ սպիտակուցներ են, որոնք համապատասխանում են ՄԻԱՎ-ի բարձր իմունային ռեակտիվ շրջաններին:Վերահսկիչ գոտում գունավոր հսկիչ գոտի է հայտնվում թեստի ընթացակարգի վերջում՝ անկախ թեստի արդյունքից:Այս հսկիչ գոտին կոլոիդային ոսկու կոնյուգատի արդյունք է թաղանթի վրա անշարժացած ՄԻԱՎ-ի դեմ հակամարմինին միանալուց:Վերահսկիչ գիծը ցույց է տալիս, որ կոլոիդ ոսկու կոնյուգատը ֆունկցիոնալ է:Վերահսկիչ գոտու բացակայությունը ցույց է տալիս, որ թեստը անվավեր է:
ՌԵԱԳԵՆՍՆԵՐ ԵՎ ՆՅՈՒԹԵՐ ՏՐԱԴՐՎԱԾ
Փորձարկման սարքը առանձին փայլաթիթեղ է պարկված չորացնող նյութով
• Պլաստիկ կաթոցիկ.
• Նմուշի լուծիչ
• փաթեթ Ներդիր
ՆՅՈՒԹԵՐԸ ՊԱՀԱՆՋՎՈՒՄ ԵՆ, ԲԱՅՑ ՉԵՆ ՏՐԱՄԱԴՐՎՈՒՄ
Դրական և բացասական հսկողություն (հասանելի է որպես առանձին կետ)
ՊԱՀՊԱՆՈՒՄ ԵՎ ԿԱՅՈՒՆՈՒԹՅՈՒՆ
Փորձարկման փաթեթները պետք է պահվեն 2-30℃ ջերմաստիճանում, փակ տոպրակի մեջ և չոր պայմաններում:
ԶԳՈՒՇԱՑՈՒՄՆԵՐ ԵՎ ՊԱՀԱՆՋՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐ
1) Բոլոր դրական արդյունքները պետք է հաստատվեն այլընտրանքային մեթոդով:
2) Բոլոր նմուշներին վերաբերվեք այնպես, կարծես պոտենցիալ վարակիչ լինեն:Նմուշների հետ աշխատելիս կրեք ձեռնոցներ և պաշտպանիչ հագուստ:
3) Փորձարկման համար օգտագործվող սարքերը պետք է ավտոկլավացվեն նախքան հեռացումը:
4) Մի օգտագործեք հավաքածուի նյութերը դրանց պիտանելիության ժամկետից հետո:
5) Մի փոխեք ռեակտիվները տարբեր լոտերից:
ՆՄԱՆՆԵՐԻ ՀԱՎԱՔՈՒՄ ԵՎ ՊԱՀՊԱՆՈՒՄ
1) Հավաքել ամբողջական արյան / շիճուկ / պլազմայի նմուշներ` կանոնավոր կլինիկական լաբորատոր ընթացակարգերով:
2) Պահպանում. ամբողջական արյունը չի կարող սառեցնել:Նմուշը պետք է պահվի սառնարանում, եթե այն չի օգտագործվել հավաքման նույն օրը:Նմուշները պետք է սառեցվեն, եթե չօգտագործվեն հավաքումից հետո 3 օրվա ընթացքում:Օգտագործելուց առաջ խուսափեք նմուշները սառեցնելուց և հալեցնելուց ավելի քան 2-3 անգամ:Նատրիումի ազիդի 0,1%-ը կարող է ավելացվել նմուշին որպես կոնսերվանտ՝ չազդելով հետազոտության արդյունքների վրա:
ՓՈՐՁԻ ԿԱՐԳԸ
1) Օգտագործելով կցված պլաստիկ կաթիլիչը նմուշի համար, 1 կաթիլ (10 μl) ամբողջական արյուն / շիճուկ / պլազմա բաժանեք փորձարկման քարտի շրջանաձև նմուշի հորին:
2) Նմուշի լուծիչի 2 կաթիլ ավելացրեք նմուշի ջրհորի մեջ, նմուշը ավելացնելուց անմիջապես հետո, կաթիլային լուծիչի սրվակից (կամ ամբողջ պարունակությունը մեկ փորձարկման ամպուլից):
3) Մեկնաբանել թեստի արդյունքները 15 րոպեում:
Նշումներ:
1) Բավարար քանակությամբ նմուշի լուծիչի կիրառումը կարևոր է թեստի վավեր արդյունքի համար:Եթե փորձարկման պատուհանում մեկ րոպե անց միգրացիան (մեմբրանի թրջումը) չի նկատվում, նմուշի հորին ավելացրեք ևս մեկ կաթիլ լուծիչ:
2) ՄԻԱՎ-ի հակամարմինների բարձր մակարդակ ունեցող նմուշի համար դրական արդյունքները կարող են հայտնվել մեկ րոպեի ընթացքում:
3) Մի մեկնաբանեք արդյունքները 20 րոպե հետո
ԹԵՍՏԻ ԱՐԴՅՈՒՆՔՆԵՐԻ ԿԱՐԴԱՑՈՒՄ
1)ԴրականՄեմբրանի վրա հայտնվում են և՛ մանուշակագույն կարմիր թեստային ժապավեն, և՛ մանուշակագույն կարմիր հսկիչ ժապավեն:Որքան ցածր է հակամարմինների կոնցենտրացիան, այնքան թույլ է փորձարկման գոտին:
2) ԲացասականՄեմբրանի վրա հայտնվում է միայն մանուշակագույն կարմիր հսկիչ ժապավենը:Փորձարկման գոտու բացակայությունը ցույց է տալիս բացասական արդյունք:
3)Անվավեր արդյունք՝Հսկիչ գոտում միշտ պետք է լինի մանուշակագույն կարմիր հսկիչ գոտի՝ անկախ թեստի արդյունքից:Եթե վերահսկողության գոտին չի երևում, ապա թեստը համարվում է անվավեր:Կրկնեք թեստը՝ օգտագործելով նոր թեստային սարք:
Նշում. Նորմալ է ունենալ մի փոքր թեթևացված հսկիչ ժապավեն՝ շատ ուժեղ դրական նմուշներով, քանի դեռ այն հստակ տեսանելի է:
ՍԱՀՄԱՆԱՓԱԿՈՒՄ
1) Այս թեստում կարող է օգտագործվել միայն մաքուր, թարմ, ազատ հոսող ամբողջական արյուն/շիճուկ/պլազմա:
2) Թարմ նմուշները լավագույնն են, բայց սառեցված նմուշները կարող են օգտագործվել:Եթե նմուշը սառեցվել է, ապա պետք է թույլ տալ, որ այն հալվի ուղղահայաց դիրքում և ստուգվի հեղուկության համար:Ամբողջ արյունը չի կարելի սառեցնել:
3) Մի խառնեք նմուշը:Նմուշը հավաքելու համար պիպետտ տեղադրեք նմուշի մակերեսից անմիջապես ներքեւ: